專利基本信息

說明書

一種高純度蟛蜞菊內(nèi)酯的制備方法

技術(shù)領(lǐng)域

[0001] 本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，特別涉及一種高純度蟛蜞菊內(nèi)酯的制備方法。

背景技術(shù)

[0002] 墨旱蓮(Eclipta prostrata L )俗稱旱蓮草，菊科鱧腸的地上干燥部分，為常用中藥之一，具有滋肝補腎，涼血止血之功能。國外研究認(rèn)為，墨旱蓮抗肝毒的主要活性成分是香豆素類物質(zhì)——膨蜞菊內(nèi)酯與去甲蟛蜞菊內(nèi)酯。這兩種成分對CCl4、GalNAc等所致大鼠肝損傷，均有明顯的肝保護作用，且以蟛蜞菊內(nèi)酯的作用更強。蟛蜞菊內(nèi)脂是墨旱蓮的主要有效成分，為墨旱蓮及其提取物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及檢測用重要特征性物質(zhì)。

[0003] 蟛蜞菊內(nèi)酯，CAS號524-12-9，分子式C16HltlO7，分子量314.25，分子結(jié)構(gòu)式如下:

[0004]

[0005] 常規(guī)制備蟛蜞菊內(nèi)酯的方法多為反復(fù)柱層析分離，存在占地面積大，溶劑大量使用，對環(huán)境和操作人員造成不良影響，且工藝重復(fù)性差，生產(chǎn)成本高登缺點。高速逆流色譜儀操作簡便，制備量大，樣品無損耗，分離效率高，低污染?，F(xiàn)已廣泛應(yīng)用于生物，醫(yī)藥，環(huán)保等領(lǐng)域化學(xué)物質(zhì)的制備分離和純化。

[0006] CN103265554A公開了一種去甲蟛蜞菊內(nèi)酯的制備方法，墨旱蓮用甲醇溶液超聲提取、乙酸乙酯萃取后采用大孔樹脂吸附，然后用甲醇溶液洗脫，但是其得到的去甲蟛蜞菊內(nèi)酯純度不高，仍需進一步改進。

發(fā)明內(nèi)容

[0007] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種高純度蟛蜞菊內(nèi)酯的制備方法，該方法采用硅膠柱吸附，并使用石油醚和乙酸乙酯等度洗脫，操作簡便，回收率高，分離量大，低污染，得到的蟛蜞菊內(nèi)酯純度高，具有良好的應(yīng)用前景。

[0008] 本發(fā)明的一種高純度蟛蜞菊內(nèi)酯的制備方法，包括:

[0009] 墨旱蓮原料粉碎，加入5-10倍量工業(yè)甲醇溶液超聲提取2-3次，提取液濃縮后用乙酸乙酯萃取，收集萃取液回收試劑加入硅膠柱吸附，用體積比為5:1~50:1的石油醚和乙酸乙酯等度洗脫，洗脫液濃縮得到粗提物，再用高速逆流色譜儀分離，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集流份減壓濃縮，結(jié)晶，干燥即得；其中，高速逆流色譜儀所用溶劑為體積比為

0.1-2:1-3:0.5-4:1-3的正己烷、乙酸乙酯、乙醇和水。

[0010] 所述硅膠的規(guī)格為柱層析用100-500目。[0011] 所述高速逆流色譜儀分離條件為:取上相做固定相，下相為流動相，主機轉(zhuǎn)速為700-1000rpm，流速為 l_4ml/min，水浴溫度為 10_35°C。

[0012] 所述結(jié)晶采用甲醇、乙醇、水中的一種或兩種結(jié)晶。

[0013] 有益效果

[0014] 本發(fā)明采用硅膠柱吸附，并使用石油醚和乙酸乙酯等度洗脫，操作簡便，回收率高，分離量大，低污染，得到的蟛蜞菊內(nèi)酯純度高；適用各種型號高速逆流色譜儀(HSCCC)和各種含量蟛蜞菊內(nèi)酯的制備，易于實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化放大。

具體實施方式

[0015] 下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。

[0016] 實施例1

[0017] 墨旱蓮原料粉碎，稱2kg，每次加入10L50%甲醇溶液超聲提取30分鐘，提取3次，提取液減壓濃縮至1000ml，加等體積水飽和乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。萃取物用100-200目硅膠和乙酸乙酯拌樣，加入到硅膠柱層析，用石油醚/乙酸乙酯(體積比50:1)洗脫，洗脫液減壓濃縮得粗提物，用于高速逆流分離。取正己烷、乙酸乙酯、乙醇、水按體積比1:3:1:2混合，振搖后靜置分層。取上相注滿高速逆流色譜儀作為固定相，轉(zhuǎn)動主機，轉(zhuǎn)速800rpm,同時以2ml/min泵入下相做流動相,建立動態(tài)平衡后,用流動相溶解粗提物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標(biāo)成分，連續(xù)制備，合并回收試劑，濃縮后甲醇結(jié)晶，得`到蟛蜞菊內(nèi)酯3g，經(jīng)HPLC檢測，含量98.9%，經(jīng)UV、IR、MS、HNMR、CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。

[0018] 實施例2

[0019] 墨旱蓮原料粉碎，稱2kg，每次加入20L60%甲醇溶液超聲提取30分鐘，提取3次，提取液減壓濃縮至1000ml，加等體積水飽和乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。萃取物用100-200目硅膠和乙酸乙酯拌樣，加入到硅膠柱層析，用石油醚/乙酸乙酯(體積比40:1)洗脫，洗脫液減壓濃縮得粗提物，用于高速逆流分離。取正己烷、乙酸乙酯、乙醇、水按體積比0.5:2:1:3混合，振搖后靜置分層。取上相注滿高速逆流色譜儀作為固定相，轉(zhuǎn)動主機，轉(zhuǎn)速800rpm,同時以2ml/min泵入下相做流動相，建立動態(tài)平衡后,用流動相溶解粗提物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標(biāo)成分，連續(xù)制備，合并回收試劑，濃縮后甲醇結(jié)晶，得到蟛蜞菊內(nèi)酯3.2g，經(jīng)HPLC檢測，含量98.6%，經(jīng)UV、IR、MS、HNMR、CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。

[0020] 實施例3

[0021] 墨旱蓮原料粉碎，稱2kg，每次加入17L70%甲醇溶液超聲提取30分鐘，提取3次，提取液減壓濃縮至1000ml，加等體積水飽和乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。萃取物用100-200目硅膠和乙酸乙酯拌樣，加入到硅膠柱層析，用石油醚/乙酸乙酯(體積比15:1)洗脫，洗脫液減壓濃縮得粗提物，用于高速逆流分離。取正己烷、乙酸乙酯、乙醇、水按體積比0.5:1:1:2混合，振搖后靜置分層。取上相注滿高速逆流色譜儀作為固定相，轉(zhuǎn)動主機，轉(zhuǎn)速850rpm,同時以3ml/min泵入下相做流動相,建立動態(tài)平衡后,用流動相溶解粗提物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標(biāo)成分，連續(xù)制備，合并回收試劑，濃縮后甲醇結(jié)晶，得到蟛蜞菊內(nèi)酯3.9g，經(jīng)HPLC檢測，含量98.3%，經(jīng)UV、IR、MS、HNMR、CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。

[0022] 實施例4

[0023] 墨旱蓮原料粉碎，稱2kg，每次加入15L70%甲醇溶液超聲提取30分鐘，提取3次，提取液減壓濃縮至1000ml，加等體積水飽和乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。萃取物用100-200目硅膠和乙酸乙酯拌樣，加入到硅膠柱層析，用石油醚/乙酸乙酯(體積比5:1)洗脫，洗脫液減壓濃縮得粗提物，用于高速逆流分離。取正己烷、乙酸乙酯、乙醇、水按按體積比2:1:2:2.5混合，振搖后靜置分層。取上相注滿高速逆流色譜儀作為固定相，轉(zhuǎn)動主機，轉(zhuǎn)速900rpm,同時以3.5ml/min泵入下相做流動相,建立動態(tài)平衡后，用流動相溶解粗提物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標(biāo)成分，連續(xù)制備，合并回收試劑，濃縮后甲醇結(jié)晶，得到蟛蜞菊內(nèi)酯2.9g，經(jīng)HPLC檢測，含量99.5%，經(jīng)UV、IR、MS、HNMR、CNMR等表征 其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。